酶标仪的检测原理

光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光， 400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到颜色，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的赤色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
　　检测单位：
　　光经过被检测物，前后的能量差异便是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量联系。
　　检测单位用OD值表明， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表明被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其间trans为检测物的透光值。依据Bouger-amberT-beer规律，OD值与光强度成下述联系：
E＝OD=logΙ0/Ι其间E表明被吸收的光密度， Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。
　　OD值由下述公式核算：
　　E＝OD=C×D×E
　　C为检测物的浓度
　　D为检测物的厚度
　　E为摩尔因子
　　在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。假如挑选其它的波长段，就会形成检测成果的不精确。因而，在测定检测物时，咱们挑选特定的波长进行检测，称为丈量波
长。
　　可是每一种物质对光能量还存在必定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，咱们再选取一个参照波长，以消除这个不精确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差能够消除非特异性吸收。
　　Anthos 酶标仪检测值核算
　　仪器中的检测器接纳透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器界说没有光源下的透光值为 0％，没有检测物的透光值为100％。则实践检测中，检测物的透光值均在 0％一100％之间。透光值
的核算如下：
　　T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
　　其间T为透光值， Meas为检测的二进位数值， Min为在 0％的情况下检测的二进位数值， Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下：
　　MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
　　Anthos 酶标仪的中心定位
　　仪器会主动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不精确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的丈量，选取最中心的5个点的均值为本孔的OD值。
　　光源的参照通道
　　参照通道是用来校准因为电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
　　酶标仪的用处和其它提示
　　用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包含临床实验室。
　　质量操控
　　质量操控是试剂检测的重要要素。请按照试剂说明书的要求进行质量操控。
　　空白校对
　　有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请按照试剂盒的　　说明书要求进行。
　　检测成果的解说
　　因为有相当多的要素会影响检测的成果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会形成OD值的不同，因而，　　只要运用同一酶标板反响的试剂检测成果才干比较和剖析。对成果的临床解说请按照试剂盒的说明书进行。