高速反流色谱法(HSCCC)是一项强有力的别离技能，并逐步运用于天然产品化学。剖析型HSCCC的仪器现已能够得到，并有在天然产品化学方面运用的总述。若干种类型的检测器现已被连接到剖析型HSCCC仪器上，其间包含UV、IR和质谱(MS)等检测器。这些体系能供给关于溶质结构的重要信息。但是它们关于HSCCC的运用受限于仪器运用的杂乱性(MS)，高噪音水平(UV)或活络度(IR)。
光散射作为液相色谱法的一种挑选检测原理已被提出。蒸腾激光光散射检测法(ELSD)作为一种通用检测办法，是根据以下原理：洗脱液［例如来自一个高效液相色谱(HPLC)柱］被雾化和蒸腾，从而在载气流中留下溶质的细小粒子。这些粒子经过一激光束，使光产生散射，散射的光被检测。其呼应的巨细与经过检测器的溶质质量有关。现已证明，运用HPLC剖析碳水化合物和类脂时，ELSD会特别有用。
1 试验
溶媒HPLC级(Burdick&Jackson)。水经过Milli-Q体系(Millipore)净化。参比物从C.RothInc.(Karlsruhe,F.R.G.)购买。“微量”高速反流色谱仪与一个30mL螺旋管和0.85mmI.D.聚四氟乙烯管从P.C.Inc.(Potomac,MD,U.S.A.)取得；溶媒运用MiltonRoy试验室的泵泵取；ELSD体系从Varex(Burtonsville,MD,U.S.A.)取得；色谱图被记录在Varian9176型图记录仪上(满标1mV)。
首先用固定相充溢HSCCC螺旋管，然后开端旋转，这时固定相被继续泵入。当转速到达1800r.min-1时，活动相经过进口被引进。当螺旋管到达平衡今后(即流出物由固定相改为活动相时)，将流速调为0.8mL.min-1。然后，将螺旋管出口与光散射检测器相连接。当基线变得滑润时指示溶媒已被彻底蒸腾。将化合物1～4(见图1)溶解在固定相里。样品溶液经过Valco公司的六通阀和0.25mL样品环注入(图1，0min)。注入的量为300μg(1)，10μg(2)，35μg(3)和20μg(4)。反压低于1378.95kPa，运转后固定相保存90%。检测器预热20min；时刻恒量为1s。将检测器的随意活动设为8，构成一个反压为220.6kPa的氮载气流。
2 成果和评论
HSCCC完结的规范化合物1～4的混合物的别离，这种别离由溶媒体系氯仿—甲醇—水(13∶7∶8)基层作为活动相完结。流速为0.8mL.min-1。螺旋管流出物被直接引进ELSD体系的喷雾室内。喷雾室和排气管的温度被别离设定为110℃和80℃。设定相对高的温度是为了蒸腾活动相中的少数水份，并使非保存固定相(含水的)尽或许微滴化。含水固定相遗留下来不会影响色谱。关于2～4化合物(熔点超越200℃)每种化合物每次打针10～35μg时，能够得到很好的检测呼应。而化合物1即便每次打针大于100μg，也仅可给出相对弱小的检测信号。对此或许的解释为：熔点为117℃的7-甲氧基香豆素(1)以液状微滴经过检测器光束，由此导致激光光线不能有效地散射。当同一样品混合物被别离时，其信噪比优于光电二极管检测器。
ELSD是一种活络而非专一性的质量检测办法，其检测限大于毫微克数量级。但是，假如物质的熔点等于或小于喷雾室温度，则或许难以检测。正如这儿运用的比如。这一点关于一个杂乱的样品，象剖析植物提取物时则有必要考虑。因为ELSD是一个非损坏技能，为了在制备型HSCCC运用这个检测办法，能够在洗脱线上设备一个流量别离管。因为固定相的残留而引起检测噪音，典型的象UV检测器，则被彻底消除了。咱们的开始成果显现，对剖析型HSCCC来说，ELSD是一种抱负的、易运用的检测手法。进一步关于无紫外线吸收化合物和高紫外堵截的溶媒的点评，现在正在咱们试验室进行中。
